SÍNTESIS DE NUEVOS ANÁLOGOS DE BRASINOESTEROIDES A PARTIR DE ÁCIDO HIODESOXICÓLICO CON POTENCIAL ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA Y ANTINEOPLÁSICA

Abstract

Los brasinoesteroides son un grupo de fitohormonas que participan en diversosprocesos fisiológicos en las plantas, cumpliendo un rol clave en la regulación delcrecimiento vegetal. En esta tesis se planteó el objetivo de sintetizar nuevos análogosde brasinoesteroides con cadena lateral corta de tipo 24-nor, manteniendo la funcióndiol en C22-C23 y usando ácido hiodesoxicólico como material de partida. Así, en estetrabajo, se describe la síntesis de compuestos tipo 2-desoxibrasinoesteroides, 3a-hidroxi, 6-oxa o 7-oxalactona, con cadena lateral tipo 24-nor,22S,23-dihidroxi/diacetil.Mediante diferentes rutas de síntesis, se logró obtener un total de 26 compuestos detipo brasinoesteroides, de los cuales 6 corresponden a nuevos análogos debrasinoesteroides (Figura 1). Además, se obtuvo la caracterización completa de loscompuestos sintetizados mediante el uso de técnicas espectroscópicas combinadas (IR,1D y 2D-RMN y EMAR).Adicionalmente, se realizaron distintos ensayos biológicos a los análogos sintetizados.En primer lugar, se midió la actividad antifúngica de 14 de los análogos sintéticos de brasinoesteroides mediante el test radial de inhibición del crecimiento micelial in vitrodel hongo patógeno Botrytis cinerea. Del total evaluado, los análogos 84 y 112presentaron elevada actividad contra el hongo (= 95 % de inhibición a 100 y 150 ppm).Por otra parte, se cuantificó la actividad promotora de elongación celular vegetal de 7de los análogos de brasinoesteroides, mediante el test RLIT de inclinación de lámina dearroz. Entre los resultados obtenidos, destacan los compuestos análogos 84, 111 y 112,que presentaron elevada actividad promotora, superando incluso al brasinólido,fitohormona utilizada como control positivo de ensayo.Por último, se evaluó la actividad citotóxica de 18 de los análogos sintéticos obtenidoscontra las líneas celulares tumorales PC-3, HT-29, MCF7 y contra la línea celular notumoral CoN, mediante un ensayo colorimétrico con Sulforodamina B (SRB). Del total delos compuestos evaluados; el análogo 112 presentó frente a PC-3 valores de IC50 de 38,6µM e índice de selectividad de 2,313, mientras que los análogos 86 y 87 presentaronfrente a HT-29 valores de IC50 de 21,4 µM y 33,5 µM e índice de selectividad de 2,099 y4,801, respectivamente.

Brassinosteroids are a widespread group of phytohormones that play an important rolein multiple physiological processes of plants and having a key role in the regulation ofplant growth. This thesis had the objective of synthesizing new analogs ofbrassinosteroids with shorter 24-nor side chains but keeping the C22-C23 diol function,starting with hyodeoxycholic acid. Thus, this work describes the synthesis of 6 new 2-deoxybrassinosteroids analogs with 3a-hydroxy, 6-oxa or 7-oxalactone, 24-nor, 22S,23-dihydroxy/diacetyl side chain type.Through different synthetic routes, a total of 26 brassinosteroid compounds wereobtained with 6 of them corresponding to new brassinosteroid analogs (Figure 1).Complete structural characterization of synthesized compounds was achieved throughcombined using of spectroscopic techniques (IR, 1D and 2D NMR and HRMS).We also have studied the bioactivities levels of synthesized analogs. First, the antifungalcapacity of 14 of the synthetic brassinosteroid analogs was measured by the radial testof in vitro mycelial growth inhibition of pathogenic fungus, Botrytis cinerea. Thus, the analogs 84 and 112 showed high activity against the fungus (= 95% inhibition at 100 and150 ppm).Moreover, growth-promoting effect 14 of the synthetic brassinosteroid analogs wasmeasured using the rice lamina inclination test (RLIT). According to the results obtained,the analogs 84, 111 and 112 were more active than brassinolide, which was used aspositive control.Finally, cytotoxic potential of 18 of the synthetic analogs obtained was measured againstthe tumor cell lines PC-3, HT-29, MCF7 and against the non-tumor cell line CoN usingsulforhodamine B (SRB) colorimetric assay. According to the results obtained, the analogcompound 112 showed against PC-3 an IC50 value of 38.6 µM and a selectivity index of2.313, while analogs 86 and 87 showed against HT-29 an IC50 value of 21.4 µM and 33.5µM and a selectivity index of 2.099 and 4.801, respectively.