Browsing by Author "ROJAS FUENTES, CLAUDIA FERNANDA"
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Thesis ESTUDIO DE ACTINOBACTERIAS MARINAS PROVENIENTES DE ISLA DE PASCUA COMO AGENTES PRODUCTORES DE COMPUESTOS BIOACTIVOS Y EVALUACIÓN DE SU POTENCIAL EN BIODEGRADACIÓN DE MICRO-PLÁSTICOS(2016) ROJAS FUENTES, CLAUDIA FERNANDA; ROJAS FUENTES, CLAUDIA FERNANDA; Universidad Tecnica Federico Santa Maria UTFSM INGENIERÍA QUíMICA Y AMBIENTAL; GUERRERO SALDES, LORNA ELENA; CAMARA HERRERA, BEATRIZ PATRICIALa resistencia antimicrobiana se ha convertido en un problema que afecta a la población a nivel mundial. Se promueve por el uso inapropiado de fármacos debido a su fácil acceso, la movilidad de la población mundial y la gran capacidad evolutiva que poseen los microorganismos. Tiene como consecuencia la disminución en la eficacia de los antibióticos para combatir enfermedades infecciosas, lo que hace que la búsqueda de nuevos compuestos bioactivos que puedan ser empleados en la producción de nuevos fármacos sea una necesidad de carácter urgente.La probabilidad de encontrar nuevas cepas bacterianas que produzcan posibles nuevos metabolitos secundarios aumenta si la búsqueda se realiza en zonas poco exploradas, con biodiversidad poco conocida, como lo son los ecosistemas marinos. Además, la búsqueda generalmente se centra en cepas bacterianas pertenecientes al phylum Actinobacteria, dada la gran evidencia de cepas relacionadas con este phylum capaces de producir metabolitos secundarios usados como antibióticos, antifúngicos y antitumorales.Es por esto que esta investigación se centra en la búsqueda de actinobacterias a partir de muestras de sedimentos y esponjas marinas obtenidas del Islote Motu Nui y la playa Ovahe, ambos lugares ubicados en Isla de Pascua, Chile, y con una biodiversidad microbiana poco explorada.El aislamiento se realizó mediante la utilización de 4 métodos y 5 medios de cultivo selectivos. El análisis comparativo de las secuencias parciales del gen rRNA 16S permitió identificar un total de 51 actinobacterias, pertenecientes a 12 géneros: Arthrobacter, Brachybacterium, Brevibacterium, Knoellia, Kocuria, Kytococcus, Micrococcus, Nesterenkonia, Nocardioides, Rhodococcus, Serinicoccus y Streptomyces. Para evaluar el potencial biotecnológico de producción de compuestos bioactivos se realizaron ensayos contra 5 cepas bacterianas de interés clínico: Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella enterica. Como primera selección de actinobacterias de interés se realizaron ensayos de antibiogramas, dónde se observó que las mayores inhibiciones contra alguna de las cepas bacterianas correspondieron a 8 cepas pertenecientes a los géneros Brachybacterium, Nocardioides y Streptomyces. Éstas fueron utilizadas para ensayos de actividad antimicrobiana con extractos crudos. Las 8 cepas presentaron inhibiciones contra Staphylococcus aureus, donde se observó un máximo halo de inhibición de 16 [mm] de diámetro por parte de una cepa del género Brachybacterium, misma cepa que además presentó inhibición contra Listeria monocytogenes. Se evaluó, además, la presencia en estas 8 cepas de genes que codifican policétidos sintasas (PKS) y sintetasas de péptidos no ribosomales (NRPS), enzimas involucradas en la síntesis de compuestos bioactivos. Se observó que las cepas de los géneros Nocardioides y Streptomyces presentan al menos dos de los genes que codifican para PKS-I, PKS-II o NRPS, mientras que las cepas del género Brachybacterium no presentaron resultados positivos para ninguno de los tres casos.Por otro lado, y dado que Isla de Pascua se ha visto afectada por contaminación por micro-plásticos en sus ecosistemas marinos, tanto a nivel de aguas superficiales, sedimentos marinos y zonas costeras, nace la motivación de evaluar el potencial biotecnológico de biodegradación de micro-plásticos por las actinobacterias aisladas. Se determinó la posible utilización del polietileno como única fuente de carbono por parte de una cepa del género Micrococcus, aislada de la playa Ovahe, dónde se observó una disminución de un 3,1% de masa de polietileno en un periodo de 35 días.De este estudio se concluye que existe una gran biodiversidad de actinobacterias en las muestras de sedimentos y esponjas marinas de Isla de Pascua, Chile, cuyos aislados además, poseen un gran potencial de producción de compuestos bioactivos y de biodegradación de micro-plásticos.
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