AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN TAXONÓMICA EN AGUAS RESIDUALES CONTAMINADAS POR HIDROCARBUROS

HERRERA MENESES, CARLA JEANNETTE ; PALMA TAPIA, NATALIE NICOLE (2018)

Tesis Técnico Universitario

El principal objetivo de este trabajo de investigación es aislar a la bacteria Pseudomona aeruginosa desde una muestra de agua contaminada por hidrocarburos, para ello, se realiza un análisis de pruebas físicas y bioquímicas a los microorganismos aislados. El muestreo se lleva a cabo el día martes 18 de abril del año 2017 en la empresa nacional del petróleo (ENAP) para asegurar la presencia de hidrocarburos que actúan como fuente de energía para el crecimiento de las bacterias. Para llevar a cabo la parte experimental de este trabajo se emplea la metodología de aislamiento, dilución y plaqueo expresado en unidades formadoras de colonias (UFC). Como base de crecimiento se emplean medios líquidos, sólidos y semisólidos, los cuales aportan los nutrientes y condiciones apropiadas para el desarrollo de los microorganismos. Para aislar una colonia de bacterias se deposita un inóculo de la muestra inicial en un medio agar nutritivo y otro inóculo en agar Pseudomona, luego se incuban en estufa a una temperatura cercana a los 37 °C; una vez crecidas las colonias éstas se traspasan a tubos inclinados de TSA y nuevamente se realiza una incubación. Transcurridos los días necesarios para el desarrollo de los microorganismos, se procede al traslado de las colonias a tubos con caldo asparagina, el cual permite por medio de la turbidez, reconocer la presencia de bacterias Pseudomonas; aquellos tubos que den resultado positivo en caldo asparagina se traspasan a tubos inclinados de TSA y se someten a incubación, por otro lado, aquellos que den resultado negativo son sometidos a un agotamiento por estrías en placas de agar cetrimida para posterior traspaso a tubos TSA. Finalmente se extrae de los tubos TSA (positivos y negativos), un inóculo que permite realizar la tinción Gram con la cual se define si el cultivo es mixto o puro. Se obtienen 51 cepas puras que junto con una cepa patrón de Pseudomona aeruginosa se someten a pruebas físicas y bioquímicas, estableciendo un sistema comparativo de sus metabolismos, donde se comprueba que 11 cepas del total corresponden a la bacteria Pseudomona aeruginosa.